氰化钾培养基是一种用于微生物学实验的培养基,其制备过程包括高压灭菌和添加氰化钾等步骤。
成分
蛋白胨:10克
氯化钠:5克
磷酸二氢钾:0.225克
磷酸二氢钠:5.64克
蒸馏水:1000毫升
0.5%氰化钾溶液:20毫升
pH值:7.6
制作方法
首先,将除了氰化钾之外的所有成分混合均匀,并将其分装入已消毒的玻璃容器中。随后,在121℃的高温下进行高压灭菌处理,持续时间约为15分钟。完成灭菌后,将容器置于冰箱中,以确保其彻底冷却。接下来,向每100毫升的培养基中加入0.5%的氰化钾溶液2毫升,最终得到的氰化钾浓度为1:10000。然后,将制备好的培养基分装至已经灭菌的试管中,每个试管大约容纳4毫升的液体。最后,使用灭菌过的橡胶塞密封试管,并存放在温度为4℃的冰箱中,可以保持至少两个月的有效期。此外,为了进行对比实验,还需要准备不含氰化钾的对照培养基。
试验方法
在使用氰化钾培养基进行实验时,需要注意安全操作。首先,将待检测的菌株接种至蛋白胨水中,制成稀释菌液。接着,分别从中取出一环菌液,接种至氰化钾培养基和对照培养基中。整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。之后,将接种后的试管放置在恒温箱中,设定温度为36±1℃,并培养1至2天。在此期间,定期观察培养基上的菌落情况。如果在氰化钾培养基上出现菌落,则表示该菌株不受氰化钾的影响,即为阳性;而在对照培养基上未见菌落,则表明该菌株受到氰化钾的抑制作用,即为阴性。值得注意的是,氰化钾具有极高的毒性,因此在操作过程中务必谨慎,避免接触皮肤或吸入气体。特别是在夏季,为了避免氰化钾分解导致浓度下降,建议在低温环境下进行培养基的分装工作。
参考资料 >
氰化钾(KCN)培养基.青岛海博生物.2024-10-31